液相色谱仪常见的6个故障及处理办法

液相色谱仪常见的6个故障及处理办法 1、气泡溢出 流动相内有气泡,关闭泵,打开泄压阀,打开purg键,清洗脱气,气泡不断从过滤器冒出,进入流动相,无论打开purge键几次,都无法清除不断产生的气泡。原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。处理过滤器浸泡于5硝酸溶液中,超声清洗几分钟即可;
亦可将过滤器浸泡于5硝酸溶液中12~36小时,轻轻震荡几次,再将过滤器用纯水清洗几次,打开泄压阀,打开purge键清洗脱气,如仍有气泡不断从过滤器冒出,继续将过滤器浸泡于5硝酸溶液中,如没有气泡不断从过滤器中冒出,说明过滤器内部的霉菌菌团已被硝酸破坏,流动相可以流畅地通过过滤器。打开泄压阀,打开泵,流速调至1.0~3.0ml/min,纯水冲洗过滤器1小时左右。即可将过滤器清洗干净。关闭泄压阀,纯甲醇冲洗半小时即可。

2、峰面积重复性不佳(1)进样阀漏液。(2)加样针不到位。(3)液量不足。处理对于第一种情况更换进样阀垫圈;
对于第二种情况保证加样针插到底,注射样品溶液后须快速、平稳地从LOAD状态转换到INJECT状态,以保证进样量的准确。日常工作中,液相色谱仪的保养非常重要,如要注意不要让空气进入输液系统和高压泵中,储液器内的溶液如长时间未用应清洗储液器并更换溶液,每次用完色谱仪后缓冲液要用纯水冲洗干净,防止无机盐析出或沉积;
样品的前处理也很重要,任何样品都要尽可能地去除杂质,完全溶解,尽量减少对色谱柱的污染,以延长色谱柱的使用寿命,同时避免注射过浓的样品溶液,以免残留液在进样阀内析出固体引起堵塞;
色谱柱作好标记,用于不同分析目的的色谱柱不要混用等。

3、柱压高原因(1)缓冲液盐分如(乙酸铵等)沉积于柱内。(2)样品污染沉积。处理对于第一种情况先用40~50℃的纯水,低速正向冲洗柱子,待柱压逐渐下降后,相应提高流速冲洗,柱压大幅度下降后,用常温纯水冲洗,之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟;
对于第二种情况,由样品的沉积引起污染的C18柱,和纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇异丙醇(46)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再用换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,最后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。

4、既无压力指示,又无液体流过(1)泵密封垫圈磨损。

(2)大量气泡进入泵体。处理对于第一种情况,更换密封垫圈;
对于第二种情况,在泵作用的同时,用一个50ml的玻璃针筒在泵的出口处帮助抽出空气。

5、压力波动大,流量不稳定 原因系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间夹有异物,使得两者不能密封。处理工作中注意观察流动相的量,保证不锈钢滤器沉入储液器瓶底,避免吸入空气,流动相要充分脱气。如为单向阀和阀座之间夹有异物,拆下单向阀,放入盛有丙酮的烧杯用超声波清洗。

6、出峰不佳,峰分叉(1)色谱柱被污染。

(2)柱头填料塌陷。处理对于第一种情况,先用纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇异丙醇(46)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,最后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。如冲洗后依然出峰不佳,则考虑第二种情况。对于第二种情况,拧开柱头,检查柱填料是否硬结或塌陷。去除硬结部分(污染的填料),装入新填料,滴一滴甲醇,填料下陷,再填,用与柱内径相同的顶端平滑的不锈钢杆压紧,再填平,滴甲醇,再压紧反复几次,直至装满填平。柱头用甲醇冲洗干净,擦净柱外壁的填料,拧紧柱头,用纯甲醇冲洗30分钟以上。

红外谱图太复杂试试这个红外图谱口诀吧 红外识谱图看似复杂,其实也有规律可循,试试这个口诀,说不定也是一种方法。

红外可分远中近,中红特征指纹区。1300来分界,注意横轴划分异。

看图要知红外仪,弄清物态液固气。样品来源制样法,物化性能多联系。

识图先学饱和烃,三千以下看峰形。2960、2870是甲基,2930、2850亚甲峰。

1470碳氢弯,1380甲基显。二个甲基同一碳,1380分二半。

面内摇摆720,长链亚甲亦可辨。烯氢伸展过三千,排除倍频和卤烷。

末端烯烃此峰强,只有一氢不明显。化合物,又键偏,~1650会出现。

烯氢面外易变形,1000以下有强峰。910端基氢,再有一氢990。

顺式二氢690,反式移至970;
单氢出峰820,干扰顺式难确定。

炔氢伸展三千三,峰强很大峰形尖。三键伸展二千二,炔氢摇摆六百八。

芳烃呼吸很特征,1600~1430。1650~2000,取代方式区分明。

900~650,面外弯曲定芳氢。五氢吸收有两峰,700和750;

四氢只有750,二氢相邻830;
间二取代出三峰,700、780,880处孤立氢 醇酚羟基易缔合,三千三处有强峰。C-O伸展吸收大,伯仲叔醇位不同。

1050伯醇显,1100乃是仲,1150叔醇在,1230才是酚。

1110醚链伸,注意排除酯酸醇。若与π键紧相连,二个吸收要看准, 1050对称峰,1250反对称。苯环若有甲氧基,碳氢伸展2820。

次甲基二氧连苯环,930处有强峰,环氧乙烷有三峰,1260环振动, 九百上下反对称,八百左右最特征。缩醛酮,特殊醚,1110非缩酮。

酸酐也有C-O键,开链环酐有区别,开链强宽一千一,环酐移至1250。

羰基伸展一千七,2720定醛基。吸电效应波数高,共轭则向低频移。

张力促使振动快,环外双键可类比。二千五到三千三,羧酸氢键峰形宽, 920,钝峰显,羧基可定二聚酸、酸酐千八来偶合,双峰60严相隔, 链状酸酐高频强,环状酸酐高频弱。羧酸盐,偶合生,羰基伸缩出双峰, 1600反对称,1400对称峰。1740酯羰基,何酸可看碳氧展。

1180甲酸酯,1190是丙酸,1220乙酸酯,1250芳香酸。

1600兔耳峰,常为邻苯二甲酸。氮氢伸展三千四,每氢一峰很分明。

羰基伸展酰胺I,1660有强峰;
N-H变形酰胺II,1600分伯仲。

伯胺频高易重叠,仲酰固态1550;
碳氮伸展酰胺III,1400强峰显。

胺尖常有干扰见,N-H伸展三千三,叔胺无峰仲胺单,伯胺双峰小而尖。

1600碳氢弯,芳香仲胺千五偏。八百左右面内摇,确定最好变成盐。

伸展弯曲互靠近,伯胺盐三千强峰宽,仲胺盐、叔胺盐,2700上下可分辨, 亚胺盐,更可怜,2000左右才可见。硝基伸缩吸收大,相连基团可弄清。

1350、1500,分为对称反对称。氨基酸,成内盐,3100~2100峰形宽。

1600、1400酸根展,1630、1510碳氢弯。盐酸盐,羧基显,钠盐蛋白三千三。

矿物组成杂而乱,振动光谱远红端。钝盐类,较简单,吸收峰,少而宽。

注意羟基水和铵,先记几种普通盐。1100是硫酸根,1380硝酸盐, 1450碳酸根,一千左右看磷酸。硅酸盐,一峰宽,1000真壮观。

勤学苦练多实践,红外识谱不算难 HPLC常见的谱图问题解决方法全攻略 A 拖延峰 B 峰延前 C 峰分叉 D 峰变形 E 早出的峰变形 F 早出的峰拖尾程度大于晚出的峰 G K增加时 拖尾更严重 H 酸性或碱性化合物的峰拖尾 I 额外的峰 J 保留时间波动 K 保留时间不断变化 L 基线漂移 M 基线噪音(规则) N 基线噪音(不规则) O 宽峰 P 分离度降低 Q 所有的峰面积都太小 R 所有的峰面积都太大