方法一：建立Autorun.inf免疫文件
在U盘根目录下新建一个名为Autorun.inf的空文件夹，这样一来，在同一目录下病毒就无法创建Autorun.inf文件来感染U盘了。
说明：若U盘已经感染病毒，那么建立Autorun.inf免疫文件的方法就失效了，因为染毒的U盘已经存在Autorun.inf文件，所以“先下手为强”很重要。
方法二：禁用组策略中的自动播放
以Windows XP为例，其步骤是：点击“开始”→“运行”，输入gpedit.msc后回车，弹出组策略窗口，在其中依次选择“计算机配置”→“管理模板”→“系统”，打开“关闭自动播放”属性，点击已启用，在下拉菜单中选择所有驱动器，单击确定退出。
注：Windows 7下关闭自动播放的操作方法与Windows XP类似，但有个小区别在于如何找到“关闭自动播放”，Windows 7下的操作是：打开组策略窗口后，依次选择“计算机配置”→“管理模板”→“Windows组件”→“自动播放策略”，便可找到并对“关闭自动播放”进行策略设置的编辑。
方法三：禁止注册表中MountPoints2的写入
依次点击“开始”→“运行”，输入regedit后回车，打开注册表项中的
HKEY_CURRENT_USERSoftwareMicrosoftWindowsCurrentVersionExplorerMountPoints2，右键点击MountPoints2键，选择权限，将Administrators组和SYSTEM组的完全控制项都设为拒绝。
说明：禁止MountPoints2的写入是为了阻止Windows读取Autorun.inf后添加新的右键菜单项，从而阻止病毒菜单项的出现，使之无法激活病毒。