2.概述DNA粗提取和鉴定的原理。
3.尝试对动物或植物组织的DNA进行粗提取并对其进行鉴定。
【自主学习】 1.提取DNA的方法和原理 1提取生物大分子的基本思路选用一定的____________方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。
2提取DNA的方法利用DNA与____、_______和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
2.DNA的溶解性 1DNA在NaCl溶液中的溶解度 DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,其中在 ___________NaCl溶液中溶解度最低。
2在酒精溶液中的溶解性____不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些_______溶于酒精溶液。
3.DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 1对酶的耐受性蛋白酶能水解_______,但对____没有影响。
2对温度的耐受性大多数蛋白质不能忍受_________的高温,而DNA在_____以上才会变性。
3对洗涤剂的耐受性洗涤剂能够瓦解_______,但对____没有影响。
4.DNA的鉴定在_______的条件下,DNA与_______反应呈现蓝色。
二、实验设计 1.实验材料的选取选用DNA含量_________的生物组织。
2.破碎细胞,获取含DNA的滤液 1动物细胞的破碎。
①选材及方法选用动物细胞作为实验材料时,由于其无_______,因此可直接采用吸水涨破的方法。
②过程以鸡血为例。在鸡血细胞液中加入一定量的_______,同时用_______搅拌,细胞会吸水涨破,然后用纱布过滤,过滤后收集滤液即可。
2植物细胞的破碎。
①方法需要先用_______溶解细胞膜。
②过程以提取洋葱的DNA为例。
在切碎的洋葱中加入一定的_____________,进行充分地搅拌和_____,过滤后收集研磨液。
3.去除滤液中的杂质 方案一 利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中_______不同,通过控制NaCl溶液的_____去除杂质 方案二 直接在滤液中加入_______,反应10～15 min,嫩肉粉中的___________能够分解蛋白质 方案三 将滤液放在_________的恒温水浴箱中保温10～15 min,注意严格控制温度范围 4.DNA的析出利用DNA不溶于_______________这一原理,可从DNA溶液中析出比较纯净的DNA,此时DNA的状态为___________。
5.DNA的鉴定将白色丝状物溶解于5 mL物质的量浓度为__________________中,再加入4 mL的_______试剂,沸水浴加热5 min,冷却后观察溶液的颜色,同时设计不含DNA的NaCl溶液作为对照。
三、操作提示 1.以血液为实验材料时,每100 mL血液中需要加入3 g柠檬酸钠,防止_________。
2.加入洗涤剂后,动作要轻缓、柔和,否则容易产生___________,不利于后续步骤的操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以免加剧______________,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。
3.鉴定DNA用的二苯胺试剂要_________,否则会影响鉴定的效果。
四、实验操作 从鸡血细胞中提取DNA （1）破碎细胞（释放DNA）在鸡血细胞液中加入一定量的_______，同时用玻璃棒沿一个方向搅拌 （2）过滤单层纱布过滤，滤液中含有______和其他核物质，如_______、RNA等。取_______。
（3）溶解核内DNA向上述滤液中加入物质的量浓度为______mol/L的NaCl溶液，并用玻棒沿一个方向搅拌 （4）过滤将含DNA的2 mol/L的NaCl溶液用两层纱布过滤取_______。
（5）析出DNA向上述滤液中缓缓加入_______，同时用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌，出现白色絮状物，当絮状物不再增加时，停止加水（此时NaCl溶液的物质的量浓度接近______mol/L。
（6）过滤用多层纱布过滤，含_______的粘稠物留在纱布上 （7）DNA再溶解将上述粘稠物再次用______mol/L的NaCl溶液溶解 （8）提取含杂质较少的DNA向上述滤液中加入等体积的、冷却的、体积分数为95的酒精溶液，静置2-3 min,出现______________，用玻璃棒将丝状物卷起。
【合作探究】 主题1 DNA粗提取与鉴定的方法 1.DNA溶解性原理 结合DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线，分析DNA在不同浓度NaCl溶液中的溶解度有何特点。
1低于0.14 mol/L时DNA的溶解度随NaCl溶液物质的量浓度增加而逐渐_______。
2高于0.14 mol/L时DNA的溶解度随NaCl溶液物质的量浓度增加而逐渐_______。
2.DNA粗提取的操作思路 DNA与蛋白质在NaCl溶液中的溶解情况如下表。
2 mol/L的NaCl溶液 0.14 mol/L的NaCl溶液 DNA _____ 析出 蛋白质 不溶，部分发生盐析沉淀 _____ 探讨通过控制NaCl溶液的浓度使DNA在盐溶液中溶解或析出的思路是用________的NaCl溶液溶解DNA，然后过滤获得_____，能够去除该条件下______不能、能溶解的杂质；
调节NaCl溶液的物质的量浓度为0.14 mol/L，使DNA析出，然后过滤获得_______，能够去除该条件下仍然______不能、能够溶解的杂质。
3.DNA不溶于_________，而细胞中的某些_______则溶于酒精溶液，此特点对于提取DNA的作用是_________________________。
主题2 DNA的粗提取与鉴定的实验设计 【互动探究】 1.实验材料的选取 哺乳动物的红细胞和鸡的血液提取DNA效果更好的是_________。原因是_________细胞核DNA含量丰富，材料易得，而__________________无细胞核，不含DNA。
2.实验操作分析 1在鸡血细胞液中加入蒸馏水的目的是使鸡血细胞______涨破，释放出______。
2提取菜花的DNA时，加入洗涤剂和食盐的目的是 ①加入洗涤剂的目的洗涤剂能溶解________，有利于________的释放。
②加入食盐的目的食盐的主要成分是________，有利于________的溶解。
3探讨在DNA分子的粗提取实验中，两次向烧杯中 加入蒸馏水的目的 操作项目 目 的 第一次加蒸馏水 鸡血细胞______涨破，释放出______。
第二次加蒸馏水 稀释NaCl溶液, 使其浓度接近______ mol/L， 使DNA逐渐析出 2三次加NaCl溶液 次数 实验步骤 目的 第一次 第3步 溶解______,析出蛋白质等杂质 第二次 第7步 使DNA再______,为了获得含杂质较少的DNA 第三次 DNA鉴定 溶解DNA,以便DNA与______反应 【当堂检测】一、判断题 1.DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,它们都是有机物但都溶于酒精。
2.做DNA粗提取实验时,可用新鲜猪血代替鸡血。
3.蛋白质和DNA在高温下都会变性,当温度下降后蛋白质不能复性而DNA可以复性。
4.在用95的冷酒精析出DNA时,应用玻璃棒沿同一个方向轻轻搅拌。
5.在实验中两次加入蒸馏水,均是为了析出DNA。
6.在析出DNA时,要缓缓加入蒸馏水,直到出现絮状物为止。
7.洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度。
二、单项选择题 1.2017连云港高二检测下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验原理的叙述正确的是 A.DNA在NaCl溶液中的溶解度,随NaCl溶液浓度的降低而减小 B.利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNA C.DNA是大分子有机物,不溶于水而溶于某些有机溶剂 D.在沸水中,DNA遇二苯胺会出现紫色反应 2.在DNA粗提取与鉴定实验中,将获得的含有DNA的黏稠物含较多物质分别处理如下,其中杂质所处的位置在 操作过程 黏稠物 滤液 放入2 mol/L的氯化钠溶液中,搅拌后过滤 ① ② 放入0.14 mol/L的氯化钠溶液中,搅拌后过滤 ③ ④ 放入冷却的95的酒精溶液中,搅拌后过滤 ⑤ ⑥ A.①④⑤ B.①③⑥ C.①④⑥D.②④⑥ 3.2017常州高二检测下图为“DNA粗提取与鉴定”实验的相关操作。这些操作目的正确的是 A.①是洗涤红细胞,去除血细胞表面的杂质 B.②是溶解DNA,去除不溶于酒精的杂质 C.③溶解DNA,去除不溶于2 mol/LNaCl溶液的杂质 D.④稀释NaCl溶液,去除不溶于低浓度NaCl溶液的杂质 4.在DNA的粗提取实验过程中,对DNA提取量影响较小的是 A.使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂,释放出DNA等核物质 B.搅拌时要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动 C.在析出DNA黏稠物时,要缓缓加入蒸馏水,直到黏稠物不再增多 D.要用冷酒精沉淀DNA,甚至再将混合液放入冰箱中冷却 6.2017赤峰高二检测下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验操作的说法中,正确的是 A.该实验中有两次加入蒸馏水,均是为了析出DNA B.该实验中多次要求用玻璃棒单向搅拌,目的是搅拌均匀 C.该实验中有3次过滤,过滤时使用尼龙布层数与DNA的存在状态有关 D.实验3次加入NaCl溶液,第二次的目的是析出DNA 7.回答下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的问题。下图为该实验过程中的一些重要操作示意图。1正确的操作顺序是____________。请用字母和箭头表示 2上图C、E步骤都加入蒸馏水,但其目的不同,分别是____________和_________________ _______。
3上图A步骤中所用酒精必须是经过____________的才能使用,该步骤的目的是____________________。
4为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA,可滴加__________试剂后沸水浴,如果出现_____________则证明该丝状物的主要成分为DNA。
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